Rigenerand社製 3D細胞培養ツール/VITVO　：：フィルジェン株式会社：：

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3D細胞培養ツール　VITVO^®

VITVO®は、生物学的に関連した状況により近い環境を作り、正常細胞や病理学的細胞を3次元的に培養することで、in vivo環境を疑似的に再現する新世代のバイオリアクターです。

製品概要

【3D細胞培養のメリット】

3Dプラットフォームは、古典的な2D培養システムよりも創薬および毒物学における細胞培養のためのより生理的な環境を提供する可能性を有しています。推定上の薬物が前臨床動物試験および診断に移行する前に、効力および毒性に対するより高い予測を可能にし、薬物開発の減少率を低下させます。
また、3D培養は、人間のアバター環境で薬物の安全性と有効性試験を可能にする in vivo の様な状況を模倣する利点を持っています。3D培養は、遺伝子発現の異なる調節をもたらし、最終的に細胞の抗原プロフィールに影響を及ぼし、in vivo 環境を擬似的に再現することができます。

【動物実験における3Rへの対策】

動物愛護の観点から、欧米諸国ではすでに動物実験の規制が厳しくなっており、将来的に日本でも規制が厳しくなっていくことが予想されています。変化する倫理的および文化的ニーズのために、動物試験のReducing（削減）、Replacing（置換）およびRefining（改善）の3Rの原則がますます重要になってきています。
VITVO®は、ヒトや動物の細胞を宿すことができるため、小型動物の研究に代わって、医薬品開発における倫理的および経済的に大きな効果をもたらします。in vitro ハイスループットスクリーニングと in vivo モデルとの間に VITVO® を採用することで、安全性（すなわち、正常肝細胞）および有効性（すなわち、癌細胞株または原発性腫瘍細胞）の前臨床試験の信頼性を改善する薬剤スクリーニングの費用を低減することが可能です。

特長

◆シンプルな設計で使いやすい。
◆様々な細胞に利用でき、組織の再現に最適。
◆素早く培養できる。
◆蛍光色素やモニタリングツールなど、様々な市販の試薬・キットに対応。
◆6cmほどのコンパクトなサイズで、持ち運びに便利。
◆1回の使いきりで安全性が高い。

製品仕様

使い方

1. 培地充填

3Dマトリックスを境に2つのチャンバーがあり、挿入口から培地を添加して、VITVO内に充填します。片方の挿入口から充填し、反対側の挿入口から、培地が出てきたらVITVO内の培地充填は完了です。

2. 細胞充填

細胞が充填できたら、培養した細胞を注入していきます。注入後はキャップを締めれば、そのままインキュベートすることができます。挿入口から培地を入れるだけなので、培地交換などもとても簡単です。

3. 解析

培養後は、VITVOのまま付属のトレイ（96wellプレートと同じサイズ）もセットすることで顕微鏡観察だけでなく、市販のプレート解析用のセルイメージャーで読み取ることも可能です。

◆使い方動画

アプリケーション

・培養細胞の増殖モニタリング
・薬剤スクリーニング
・免疫染色
・培養細胞からDNA/RNAを抽出して遺伝子解析（マイクロアレイ、リアルタイムPCRなど）
・培養液を回収してELISA

アプリケーションノート

◆腫瘍学

・	VITVOを使用して、膠芽腫細胞（GBM）の長期培養（1か月以上）を行い、ニューロスフィアを成長させる能力を示しています。

・	VITVOマトリックス上でコロニー形成した細胞（膠芽腫細胞（GBM））に対し、IHCを行う方法が確認できます。

・	様々な細胞サブタイプ（腫瘍細胞とアクセサリー細胞）を持つ複雑な組織を再現し、優れた抗がん治療を迅速に開発するための最適なツールであることを示します。

◆神経科学

・	VITVOを使用して、3Dニューロスフィアを成長させ、成長因子を添加せずに複雑な構造を取得できることを示しています。IF（免疫蛍光）プロトコルと、神経幹細胞をオリゴデンドロサイトとニューロンに分化させる可能性を示すデータも含まれています。

◆その他

・	細胞/組織を含むデバイス全体を直接凍結保存できることを示しています。

・	ヒドロゲルをロードし、閉じたバイオリアクター内で多層構造を再現するために変更を加えた、VITVOの高い多様性に関するものです。

・	in vivo イメージングシステムを使用したVITRO内の3D細胞培養イメージングについて紹介しています。

参考文献

	・	Duval, K., Grover, H., Han, L.-H., Y., Pegoraro, A.F., Fredberg, J., and Chen, Z. (2017) Modeling Physiological Events in 2D vs. 3D Cell Culture. Physiology 32, 266-277.
	・	Horvath, P., Aulner, N., Bickle, M., Davies, A.M., Nery, E.D., Ebner, D., Montoya, M.C., Ostling, P., Pietiainen, V., Price, L.S., et al. (2016) Screening out irrelevant cell-based models of disease. Nat. Rev. Drug Discov. 15, 751-769.
	・	Fitzgerald, K.A., Malhotra, M., Curtin, C.M., O Brien, F.j., and O Driscoll, C.M. (2015). Life in 3D is never flat: 3D models to optimise drug delivery. J. Controlled Release 215, 39-54.
	・	Antoni, D., Burckel, H., Josset, E., and Noel, G. (2015) Three-Dimensional Cell Culture: A Breakthrough in Vivo. Int. J. Mol. Sci. 16, 5517-5527.
	・	Edmondson, R., Broglie, J.J., Adcock, A.F., and Yang, L. (2014). Three-Dimensional Cell Culture Systems and Their Applications in Drug Discovery and Cell-Based Biosensors. ASSAY Drug Dev. Technol. 12, 207-218.