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Cellevate社製品 3D細胞培養用ナノファイバースキャフォールド
3D NanoMatrix
TM

本製品は、独自の特許技術によって製造された、3D細胞培養のためのナノファイバースキャフォールドです。Cellevate社では、多くの競合製品で採用されているエレクトロスピニング法を改良してナノファイバーを作製しており、足場のパラメーター制御(全体的な繊維品質)とロット間差に一貫性があり、より高品質な製品となっています。


概要

標準的なフラット細胞培養表面を3次元化することによって、それらの固有の環境のより関連性の高いモデルを提供しています。3Dでの細胞培養は、多種多様な方法で実現することができ、この分野における関心の高まりは、長年にわたる技術の開発(エレクトロスピンされた細胞外マトリックスや足場、ハンギングドロップによる培養、バイオリアクター、磁気浮上やマイクロキャリア、など)につながっています。これらの3D環境で増殖させた細胞は、培養フラスコまたはマルチウェルプレートなどの従来の2次元容器で増殖させた同じ細胞よりも、元組織由来に似た生理学的特徴を示します。

【2Dおよび3D培養の違い】
2D培養 3D培養
細胞形態 フラットに広がっている。典型的な厚さは~3μm 楕円形、典型的厚さは、10~30μm
細胞接点 培地に表面積の約50%、プラスティック表面に向かって約50%、
他の細胞に対して数%しか暴露されない。
表面積の100%近くが他の細胞および培地に曝露される。
働き 細胞生存能力、分化、薬物代謝、遺伝子およびタンパク質発現、細胞機能、生体内相互作用、移動性、形態学、増殖、刺激に対する応答などに利用。


特長

3D NanoMatrix
TMは、生体適合性ナノファイバーの非常に多孔質で一貫したネットワークで構成されています。繊維は、その生来の組織における複雑な周囲の細胞の経験を効果的に模倣する環境を提供します。これらのネットワーク内の細胞は、従来の二次元(2D)表面上に見られる単層培養とは対照的に、三次元(3D)で他の細胞と増殖および相互作用することが可能です。これにより、生命科学の研究者は、より現実的なin vivoモデルを提供し、臨床試験における薬物不全の数を減らすのに役立つ、より関連性の高いデータと成功した研究が可能になります。

・ペトリ皿からプレートまで、様々なフォーマットの足場を提供
・真の三次元微小環境を再現
・クラス最小のナノファイバー繊維径(平均直径:700nm)
・足場孔の大きさ:15~30μm
・標準的な分析方法との互換性あり
・装置を必要とせず、特別な媒体や試薬が不要
・無菌処理された ready to use な製品
・生分解性プラスチックを採用し、環境に配慮した製品


3D NanoMatrixTMの技術


本製品は、ランダムまたは整列した繊維配向から選択することができます。使用する細胞の種類によって繊維方向を選択することで、より高度な3D細胞培養が可能になります。ランダムファイバーは通常の脱細胞化した組織を模倣する場合に最適です。一方、整列ファイバーは、中枢神経系、心臓および骨格筋などの繊維質の組織への利用に最適です。
細胞に合わせて足場を選択することで、ファイバーが与える培養への影響を最小限に抑え、より微小環境を忠実に再現することが可能です。


アプリケーション


ほとんどの標準的な分析方法が適用可能です。標準イメージング技術、免疫染色、組織学的分析、タンパク質抽出およびウェスタンブロッティング、細胞生存率アッセイ、MTT、多重電極アレイ(MEA)を用いた電気生理学的測定、吸光度および蛍光に基づくアッセイなどは、すべて実績があります。

【視覚化とイメージング】
従来の2Dシステムで生細胞を観察するための最も一般的な手法は、位相差顕微鏡です。しかし、この技術は、典型的な3D培養には適していません。さらに、足場を構成する繊維は細胞の輪郭を曇らせることがあります。そのため、複雑な3Dシステムでは、より効果的に視覚化する必要があります。
3D NanoMatrix
TMは、半透明性を維持しながら細胞に真の3Dマイクロ環境を提供する様に設計されているため、容易で良好な品質のイメージングおよび分析が可能です。本製品は、標準の分析機器および視覚化技術と互換性があります。

蛍光顕微鏡観察
共焦点顕微鏡観察
電子顕微鏡観察
ホログラフィック顕微鏡観察


実験プロトコルと参考文献


本製品を使用した実験のプロトコルや参考文献をご覧いただけます。

【実験プロトコル】
 ・Cell-lysis for protein extraction
 ・Cell-lysis for RNA extraction
 ・Cell Recovery by trypsination
 ・Cell viability
 ・Immunocytochemistry of cells in nanofiber scaffolds
 ・Instructions for use of Cellevates 3D NanoMatrix
 ・Laminin coating of nanofiber scaffolds
 ・Mounting nanofiber scaffolds for microscopy
 ・SEM fixation procedure
 ・Seeding Cells in the 3D NanoMatrix
 ・Western blot

【参考文献】
M. Castro-Zalis, S. Johansson, F. Johansson, U. Englund-Johansson, "Exploration of physical and chemical cues on retinal cell fate", Molecular and Cellular Neuroscience, Volume 75, September 2016, Pages 122-132
Maddaly Ravi, V. Paramesh, S.R. Kaviya, E. Anuradha, F. D. Paul Solomon, "3D Cell Culture Systems: Advantages and Applications", J. Cell. Physiol., Volume 230, Issue 1, January 2015, Pages 16-26
U. Englund-Johansson, E. Netanyah, F. Johansson, "Tailor-Made Electrospun Culture Scaffolds Control Human Neural Progenitor Cell Behavior - Studies on Cellular Migration and Phenotypic Differentiation", J. Biomaterials and Nanobiotechnology, Volume 8, Issue 1, January 2017, pages 1-21
M. Ottosson, A. Jakobsson, F. Johansson, "Accelerated Wound Closure - Fifferently Organaized Nanofibers Affect Cell Migration and Hence the Closure of Artificial Wounds in a Cell Based In Vitro Model", J. PLoS ONE, January 2017
A. Jakobsson, M. Ottosson, M. Castro-Zalis, D. O'Carroll, U. Englund-Johansson, F. Johansson, "Three-dimensional functional human neuronal networks in uncompressed low-density electrospun fiber scaffolds", J. Nanomedicine: nanotechnology, biology, and medicine, January 2017


価格

製品名 サイズ 税別価格 カタログ#
ランダムファイバースキャフォールド
3D NanoMatrixTM Petri dish 33mm, Randomized Fiber Scaffold 10枚 お問合せ P33R10
3D NanoMatrixTM 4-well plate, Randomized Fiber Scaffold お問合せ 4R10
3D NanoMatrixTM 6-well plate, Randomized Fiber Scaffold お問合せ 6R10
3D NanoMatrixTM 12-well plate, Randomized Fiber Scaffold お問合せ 12R10
3D NanoMatrixTM 24-well plate, Randomized Fiber Scaffold お問合せ 24R10
3D NanoMatrixTM 48-well plate, Randomized Fiber Scaffold お問合せ 48R10
3D NanoMatrixTM 96-well plate, Randomized Fiber Orientati 5枚 お問合せ 96R5
10枚 お問合せ 96R10
整列ファイバースキャフォールド
3D NanoMatrixTM Petri dish 33mm, Aligned Fiber Scaffold 10枚 お問合せ P33A10
3D NanoMatrixTM 4-well plate, Aligned Fiber Scaffold お問合せ 4A10
3D NanoMatrixTM 6-well plate, Aligned Fiber Scaffold お問合せ 6A10
3D NanoMatrixTM 12-well plate, Aligned Fiber Scaffold お問合せ 12A10
3D NanoMatrixTM 24-well plate, Aligned Fiber Scaffold お問合せ 24A10
3D NanoMatrixTM 48-well plate, Aligned Fiber Scaffold お問合せ 48A10
3D NanoMatrixTM 96-well plate, Aligned Fiber Orientati 5枚 お問合せ 96A5
10枚 お問合せ 96A10

お問い合わせ 試薬機器部: biosupport@filgen.jp P.052-624-4388 https://filgen.jp/
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