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Synvolux Therapeutics社製品
トランスフェクション試薬
SAINT-DNA / SAINT-sRNA / SAINT-mRNA / SAINT-Protein / SAINT-Vivo / カスタムサービス

Synvolux Therapeutics社(オランダ)は、効率の高いトランスフェクション試薬を開発、製造、販売しています。研究開発から製造までを自社で行い、独自の SAINT ベースの製剤とそのアプリケーションは、20 以上の取得済み特許と特許出願によって支えられています。


SAINT(Synthetic, Amphiphilic, INTeractive)とは?

SAINT
TMの導入技術は、in-vivo および in-vitroの両方で安全かつ無毒であることが証明されたカチオン性脂質構造のセットに基づいています。このカチオン性脂質構造は、独自に完全合成されており、カチオン頭部基および両親媒性の性質により、SAINT 脂質はほとんどの生体分子(DNA, RNA, タンパク質)や細胞膜と容易に結合します。そして、細胞内でこれらの生体分子の効率的な取り込みおよび放出を促進します。

【SAINTTM製品のメリット】
・迅速かつ簡単なプロトコル
・あらゆる種類の生体分子(DNA, RNA, タンパク質)の導入が可能
・いくつかの細胞におけるプラスミドDNAのトランスフェクション効率は最大98%
・少量のsiRNAで100%近い遺伝子サイレンシング
・in vitro および in vivo でのタンパク質およびペプチドの優れた導入
・血清に適合し、特殊なトランスフェクション培地が不要
・完全合成トランスフェクション試薬のため、安全性、無毒、アポトーシスなし、非炎症性が実証済み

【トライアルサイズのご案内】
SAINT-DNA, -RNA, -Protein, -Vivo のトライアルサイズのご用意がございます(在庫限り)。

カタログダウンロード(PDF)


SAINT-DNA

【特長】

プラスミドDNAを用いた殆どの哺乳細胞株(浮遊細胞/接着細胞)の in vitro トランスフェクションに対応しています。最大 100%のトランスフェクション効率が実証されました。本試薬 1mL で、24well プレートで最大 200 回のトランスフェクション、または 96well プレートで 1000 回のトランスフェクションが可能です。

保管条件: 4-7℃ ローラーボトルトランスフェクションに適しています。
最大 100% の効率 完全合成トランスフェクション試薬
低毒性 動物由来成分なし
血清適合性 SAINT-MIX の改良された PBS 互換バージョン


上図:SAINT-DNAの性能評価をした結果
(顕微鏡画像) GFP をエンコードしたプラスミド DNA を B16-F10 細胞に SAINT-DNA を用いてトランスフェクションし、観察した。
(左) GFP をエンコードしたプラスミドを各細胞にトランスフェクションし、2日後にフローサイトメトリーによってその効率を測定した。
(右) 4℃ で最大 7 年間保管した場合の性能の変化。GFP をエンコードしたプラスミドを CHO-K1 細胞にトランスフェクションし、2日後フローサイトメトリーで測定した。

【参考文献】

SAINT-DNA は、多くの研究で使用されている SAINT-MIX を最適化したバージョンです。
1. グルココルチコイドは、軟骨細胞外マトリックス遺伝子の発現を増強することにより、成人ヒト間葉系幹細胞の軟骨形成分化を促進する。
Derfoul A, et al. "Glucocorticoids promote chondrogenic defferentiation of adult human mesenchymal stem cells by enhancing expression of cartilage extracellular matrix genes." Stem-Cells 24(2006): 1487-1495.
2. 腫瘍細胞への標的遺伝子送達のための非ウイルス単体
van Zanten J, et al. "A nonviral carrier for targeted for targeted gene delivery to tumor cells." Cancer Gene Ther. 11(2004): 156-164.
3. プロラクチン受容体は乳がん細胞における HOXA1 刺激による発がん性を媒介する。
Hou L, et al. "The prolactin receptor mediates HOXA1 stimulated oncogenicity in mammary carcinoma cells." Int J Oncol. 41(2012): 2285-2295.

【実証済みの細胞株】
HEK293 COLO 205 HUVEC(初代細胞)
HEK293T CV-1 ヒト線維芽細胞(初代細胞)
36C2.21 ECV304 ヒトケラチノサイト(角化細胞)
A9 EVLC2 ヒトMSC(初代細胞)
B16 FLF92 L-M(TK-)
B16-F10 H5V MCF-7
BeWo HeLa MCF-12A
BHK-21 HCC38 RCC4
BT-474 HCC1954 SK-BR-3
CT26 HIAEC(初代細胞) SK-OV-3
CHO-K1 HIVEC(初代細胞) U-373 MG
COS-7 HT-29 -
COLO 16 HUAEC(初代細胞) -

【資料】
 ⇒プロトコル
 ⇒MSDS

【価格・ラインナップ】
製品名 サイズ 税別価格 Cat.#
★国内在庫あります★
SAINT-DNA トライアルサイズ
200μL ¥12,500 SD-2001-sample
SAINT-DNA 1mL ¥71,000 SD-2001-01
2mL ¥102,000 SD-2001-02
4mL ¥158,000 SD-2001-04
カスタムボリューム - お問合せ SD-2001-XX
2023年4月時点
注文合計金額が3万円未満の場合、別途送料¥2,500(北海道・沖縄の場合¥3,500)が必要となります。


SAINT-sRNA

【特長】

siRNA や miRNA mimic と inhibitor などの small RNA と正電荷の複合体を形成し、様々な哺乳類細胞株に高効率でトランスフェクションすることができます。最小限の量の siRNA で標的遺伝子を効率的にダウンレギュレートすることができます。本試薬 1mL で、24 ウェルプレートで最大 200回のトランスフェクション、または 96 ウェルプレートで最大 1000回のトランスフェクションが可能です。

保管条件: 4-7℃ 完全合成トランスフェクション試薬
少量の siRNA で標的遺伝子を効果的にダウンレギュレート ハイスループットスクリーニングに最適
低毒性 SAINT-RED の改良された PBS 互換バージョン
血清適合性 RNase フリーの生産過程

(左) GFPをコードする pDNA をトランスフェクションした B16F10 細胞(GFP+)、SAINT-sRNA を用いて GFP をコードした pDNA と GFP の siRNA をトランスフェクションした B16F10 細胞(siRNA GFP)、トランスフェクションを行っていないコントロール(GFP-)の 3 通りで検証した。トランスフェクション 2 日後にフローサイトメトリーで GFP 発現量を測定した。
(右) B16F10 細胞へ、SAINT-sRNA を用いて、GFP をコードする pDNA(GFP+B16F10)と、GFP に対する市販の siRNA(GFP siRNA1および2)またはコントロール siRNA を増量して細胞内に導入した。トランスフェクションから 3 日後の GFP 発現をフローサイトメトリーによって測定した。

【参考文献】

SAINT-sRNA は、small RNA のトランスフェクション用の SAINT-RED の改良版であり、多くの研究で使用されています。
1. High-content siRNA スクリーニング
Krausz E, et al. "High-content siRNA screening. " Molecular Biosystems 3.4(2007): 232-240.
2. プロテインキナーゼ Cα は、血管内皮増殖因子の誘導を介してヒト内皮細胞の血管新生活性を促進させる。
Xu H, et al. "Protein Kinase C alpha promotes angiogenic activity of human endothelial cells via induction of vascular endothelial growth factor. "Cardiovascular research 78.2(2008): 349-355.
3. カチオン性脂質 SAINT-18 を使用した PD-L1 および PD-L2 siRNA の樹状細胞ワクチンへの効率的な非毒性送達
Roeven M, et al. "Efficient nontoxic delivery of PD-L1 and PD-L2 siRNA into dendritic cell vaccines using the cationic lipid SAINT-18." Journal of Immunotherapy 38.4(2015): 145-154.
4. AMPK による GFAT1 リン酸化は、VEGF 誘導血管新生を促進する。
Zibrova D, et al. GFAT1 phosphorylation by AMPK promotes VEGF-induced angiogenesis. Biochem J. 2017 Mar 7;474(6):983-1001. doi: 10.1042/BCJ20160980. PMID: 28008135.

【実証済みの細胞株】
HEK293 HCC1954 MCF-7
HEK293T HeLa MDA-MB-231
A-431 HMEC-1 MEF(初代細胞)
A549 ヒトPTEC(初代細胞) PCI-12
BT-474 ヒト皮膚線維芽細胞(初代細胞) PCI-52
ciGEnC ヒト軟骨細胞(初代細胞) SCC-4
COLO 205 ヒト樹状細胞(DC) SCC-68
EA.hy 926 HUVEC(初代細胞) T/C-28a4
HaCaT LT97 U-2 OS
HCC38 MCF-12A -

【資料】
 ⇒SAINT-sRNA プロトコル
 ⇒無血清培地用プロトコル
 ⇒
MSDS


【価格・ラインナップ】
製品名 サイズ 税別価格 Cat.#
★国内在庫あります★
SAINT-sRNA トライアルサイズ
200μL ¥12,500 SR-2003-sample
SAINT-sRNA 1mL ¥76,000 SR-2003-01
2mL ¥112,000 SR-2003-02
4mL ¥170,000 SR-2003-04
カスタムボリューム - お問合せ SR-2003-XX
2023年4月時点
注文合計金額が3万円未満の場合、別途送料¥2,500(北海道・沖縄の場合¥3,500)が必要となります。


SAINT-mRNA

【特長】

mRNA と正に帯電した複合体を形成し、様々な哺乳動物細胞株への mRNA の非常に効率的なトランスフェクションを可能にする新製品です。トランスフェクション後、数時間以内に標的タンパク質を効率的かつ一過性に発現させるには、少量の mRNA が必要です。最適化された条件を使用すると、CHO-K1 や 293 細胞などの細胞株で 90~100%の効率を達成できます。1mL の本試薬で、96 ウェルプレートで最大 1000 回のトランスフェクションが可能です。

保管条件: 4-7℃ 様々な細胞におけるトランスフェクション
最大 100% の効率 動物由来成分なし
低毒性 完全合成トランスフェクション試薬
血清適合性 RNase フリー

(左) GFP をコードした mRNA を SAINT-mRNA を用いて各細胞にトランスフェクションし、24時間後にフローサイトメトリーによって導入効率を検証した。
(右) GFP をコードした mRNA を SAINT-mRNA を用いて B16-F10 細胞にトランスフェクションし、フローサイトメトリーによって 24時間まで細胞動態を観察した。

【参考文献】

SAINT-mRNA は、SAINT-RED に基づいて、大きな mRNA 分子用に最適化された、新たに処方されたトランスフェクションエージェントです。SAINT-Red は、多くの研究で RNA トランスフェクションに広く使用されています。

1. mRNA を用いたヒト誘導多能性幹細胞の cGMP 生成
Ni Y, et al. "cGMP Generation of Human Induced Pluripotent Stem Cells with Messanger RNA" Curr. Protoc. Stem Cell Biol. (2016) 39:4A. 6.1-4A.6.25.

【実証済みの細胞株】
ヒト線維芽細胞(初代細胞)

【資料】
 ⇒プロトコル
 ⇒MSDS

【価格・ラインナップ】
製品名 サイズ 税別価格 Cat.#
★国内在庫あります★
SAINT-mRNA トライアルサイズ
200μL ¥12,500 SM-2005-sample
SAINT-mRNA 1mL ¥76,000 SM-2005-01
2mL ¥112,000 SM-2005-02
4mL ¥170,000 SM-2005-04
カスタムボリューム - お問合せ SM-2005-XX
2023年4月時点
注文合計金額が3万円未満の場合、別途送料¥2,500(北海道・沖縄の場合¥3,500)が必要となります。


SAINT-Protein

【特長】

SAINT-Protein トランスフェクション試薬は、タンパク質およびペプチドと非共有結合で会合する完全合成脂質のトランスフェクション試薬です。細胞によって効果的に取り込まれる、正に帯電した複合体を形成します。様々な哺乳動物細胞(CHO-K1、COS-7、HUVEC、樹状細胞、皮膚線維芽細胞など)に利用でき、一部の細胞株では最大98%の効率が得られます。本試薬 1mL で、24 ウェルプレートで最大 50 回のトランスフェクション、または 96 ウェルプレートで最大 250 回のトランスフェクションが可能です。

保管条件: 4-7℃ 動物由来成分なし
低毒性 完全合成トランスフェクション試薬
最大 98% のトランスフェクション効率 SAINT-PhD の改良された PBS 互換バージョン


(左) 生きた CHO 細胞に SAINT-Protein を用いて β-ガラクトシダーゼをトランスフェクションさせた。洗浄・固定・透過の後、酵素活性を X-gal を用いて検出した。
(右) SAINT-Protein と複合化したオボアルブミン(ovalbumin)を C57BL/6 マウス胚性線維芽細胞または樹状細胞に添加した。MHC クラスI 制限オボアルブミン特異的 T 細胞の活性化を測定することにより、細胞質タンパク質送達を間接的に検出した。

【参考文献】

SAINT-Protein は、SAINT-PhD の改良版であり、多くの研究で使用されています。

1. アミロイド形成性β-およびγ-セクレターゼ切断に由来する APP 細胞内ドメインは、ネプリライシン発現を調節する。
Grimm MO, et al. "APP intracellular domain derived from amyloidogenic β-and γ-secretase cleavage regulates neprilysin expression. "Front. Aging Neurosci. 7(2015):77.
2. ペプチドを介した N-カドヘリン-LRP5/6 相互作用の破壊は、Wnt シグナル伝達と骨形成を促進する。
Hay E, et al. "Peptide-based mediated disruption of N-cadherin-LRP5/6 interaction promotes Wnt signaling and bone formation. "J. Bone Miner. Res. 27(2012):1852-1863.
3. 原虫 Toxoplasma gondii 14-3-3 タンパク質による寄生樹状細胞の移動性活性化作用
Weidner JM, et al. "Migratory activation of parasitized dendritic cells by the protozoan Toxoplasma gondii 14-3-3 protein." Cell Microbiol. 18(2016):1537-1550.

【実証済みの細胞株】
HEK293 ヒト線維芽細胞 ミクログリア
B16-F10 HUVEC(初代細胞) マウスポドサイト
COS-7COLO 205 Jurkat NIH/3T3
樹状細胞 MC3T3-E1 SK-OV-3
H9c2 MEF(初代細胞) U-373 MG

【資料】
 ⇒
プロトコル
 ⇒MSDS

【価格・ラインナップ】
製品名 サイズ 税別価格 Cat.#
★国内在庫あります★
SAINT-Protein トライアルサイズ
200μL ¥12,500 SP-3004-sample
SAINT-Protein 1mL ¥72,000 SP-3004-01
2mL ¥106,000 SP-3004-02
4mL ¥157,000 SP-3004-04
カスタムボリューム - お問合せ SP-3004-XX
2023年4月時点
注文合計金額が3万円未満の場合、別途送料¥2,500(北海道・沖縄の場合¥3,500)が必要となります。


SAINT-Vivo


【特長】

SAINT-Vivo は、in vivo での DNA トランスフェクションが可能となる製品です。SAINT-18 が最適化された新しい製品で、様々な研究に使用されています。In vivo でのご使用が対象で用途が多岐にわたるため、一定のプロトコルは存在しません。使用方法や適応についてご不明点がございましたら、お気軽に弊社試薬機器部までお問合せください。

【使用例紹介】

引用紹介1: ラットにおける非炎症性角膜へのトランスフェクション
C.N.Kuo らのグループは、ラットにおける非炎症性角膜トランスフェクションを示しました。彼らの論文の1つ(PMID:19596319)では、ラットの角膜血管新生の実験モデルにおいて、SAINT-18 によって送達された色素上皮由来因子(p-PEDF)をコードするプラスミドによる角膜新生血管の阻害を実証しています。
さらに別の論文(PMID:23591843)では、VEGFに対する組換えヒト化モノクローナル抗体と p-PEDF/SAINT-18 との併用について検証しています。
これらの結果から、SAINT-18を用いた抗体療法と遺伝子療法の組み合わせは、協力かつ長期的な抗血管新生作用を有する可能性があり、新生血管に起因する虚血性眼疾患の重症合併症に対する新たな治療法となる可能性があることが示されました。

引用紹介2: B型肝炎ウイルスに対する DNA ワクチン
Endmann らによって、B型肝炎ウイルス表面抗原(HBsAg)をコードする遺伝子発現ベクターのSAINTを介した送達が示されました。この DNA ワクチンを皮内注射すると、マウスで用量依存的な抗体応答が引き起こされました。(PMID: 20362204
また、同グループによる別の論文では、SAINT-18 と組み合わせて投与した場合、SAINT-18 を使用しない場合と比較して、排出リンパ節で発現ベクターが有意に多く検出されることが示されました。さらに、SAINT-18 の使用により、より大きな抗原発現が得られ、SAINT-18 と遺伝子発現ベクターの併用は、マウスとラットで良好な忍容性を示しました。(PMID: 24681271
ブタを用いた研究で、Endmann らは、比較的低用量の SAINT-18 配合 DNA ワクチンが、市販の認可された水酸化アルミニウムアジュバント化タンパク質ワクチンの通常容量と同様の免疫反応を引き起こすことを示しました。3回のワクチン接種後、SAINT-18 配合 DNA ワクチンは、特異的抗体応答の誘導を示しました。結論として、SAINT-18 DNA ワクチンは、現行の B 型肝炎ワクチンに代わる安全かつ効果的なワクチンとなる可能性があります。(PMID: 24992038

引用紹介3: 馬のメラノーマに対する治療用 DNA ワクチン療法
Hannover 大学の研究グループは、馬のメラノーマに対する治療用 DNA ワクチン接種療法における送達剤としての SAINT-18 の応用を示しました。馬の IL-12 と IL-18 をコードする DNA ベクターを 3 回接種した灰色馬は、腫瘍の負担が著しく減少しました。(PMID: 26063232

【価格・ラインナップ】
製品名 サイズ 税別価格 Cat.#
★国内在庫あります★
SAINT-Vivo トライアルサイズ
200μL ¥12,500 SV-2007-sample
SAINT-Vivo 1mL ¥96,000 SV-2007-01
2mL ¥148,000 SV-2007-02
4mL ¥228,000 SV-2007-04
カスタムボリューム - お問合せ SV-2007-XX
2023年4月時点
注文合計金額が3万円未満の場合、別途送料¥2,500(北海道・沖縄の場合¥3,500)が必要となります。


カスタムサービス


Synvolux はいくつかのカスタム製品およびサービスも提供しています。お客様のご要望に合わせて様々な製品をこれまでも開発してきました。以下にご紹介いたします。

【GMP グレードのトランスフェクション試薬】

遺伝子発現ベクター、siRNA または miRNA の使用に基づく革新的な新しい治療法を開発するために、安全で非ウイルス性の GMP グレードのトランスフェクション試薬も提供可能です。耐熱性を持つことが特長で、Radboud University Medical Center(オランダ、ナイメーヘン)の臨床試験で、移植片対腫瘍免疫を高める樹状細胞ワクチン接種に使用されています。
この臨床研究および他の臨床研究に対する SAINT 脂質の利点を説明する先行研究は、Roeven らによって報告されています。(PMID: 25839440
※GMP グレードとは、トランスフェクション試薬(SAINT-RED)を製薬条件下で製造することを意味します。お客様から納品された医薬品有効成分(siRNA)を含めた後、EMEA または FDA の承認を受ける必要があります。

仕様 バイオバーデン試験
純度 > 96%
エンドトキシン < 5 EU/ml
RNase 活性 < 0.1 mU/ml
Cetrimide < 5 CFU/ml
R2A < 5 CFU/ml
Sabouraud < 5 CFU/ml
Caso < 5 CFU/ml
Endo < 5 CFU/ml


【SAINT-O-Somes】

特定の細胞タイプまたは組織への in vivo または in vitro での生体分子の標的送達を可能にします。
生分解性、標的性、生体適合性を備えた合成試薬で、ドラッグデリバリーを用いることができます。
使用方法または使用可能性についての詳細は、お気軽にお問い合わせください!

実証例:
抗VCAM-1 SAINT-O-Somes を標的とした siRNA の内皮細胞特異的送達を in vivo で実証し、炎症を起こしたマウス腎臓で炎症遺伝子をダウンレギュレーションすることを示しました。(PMID: 24389338

お問い合わせ 試薬機器部: biosupport@filgen.jp P.052-624-4388 https://filgen.jp/
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