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超高感度デジタル ELISA 受託解析サービス
Simoa
® HD-X 受託解析サービス


概要


フィルジェンでは、超高感度デジタルオート ELISA Simoa® HD-X(Quanterix社)を用いた受託解析サービスをご提供しています。
Simoa® (single-molecule array)は、従来のELISAより1000倍高い、フェムトモーラー(fg/mL)レベルの検出感度を持つ最新のタンパク質単一分子デジタル検出技術です。
Simoaディスク上のスリットに含まれる何千ものフェムトリッターサイズのウェル内にて、磁気ビーズを用いたイムノアッセイを行い、標的分子が結合したビーズをデジタルカウントします。
これまで測定が不可能とされていたバイオマーカーの検出・定量も可能です。
解析作業は、弊社受託解析センター(名古屋)にて行います。

Simoa HD-X AnalyzerTM

特長



Simoa® ビーズテクノロジーによる超高感度測定:
従来の ELISA より最大 1,000 倍の感度で、フェムトモーラーレベルの測定が可能。
マルチプレックス測定:
マルチプレックスパネルの使用により、最大4プレックスの測定も可能。
感度および精度を犠牲にすることなく、測定に必要なサンプル量・コストを抑制。
高精度:
デジタルカウントと完全自動化された実験作業により、人為的なバラツキを最小限に抑え、効率よく正確な結果を提供。
広範なダイナミックレンジ:
低濃度でのデジタル測定、及び高濃度でのアナログ測定の両方を使用する独自のSimoaアルゴリズムにより、>4logsの広いダイナミックレンジを達成

※装置に関する詳細は、こちらをご参照ください。


Simoa
® テクノロジーによる解析の概要


本サービスで使用されるプラットフォームである Simoa® HD-X Analyzer は、サンプルの希釈から混合、洗浄、インキュベーション、蛍光の読み取り及び解析までを、全て自動化システムです。
解析には、放射状に配置された 24 個の反応チャンバーを含む Simoa® ディスクを使用します。
各アレイには、約 240,000 個のフェムトリットルサイズのウェルが含まれており、個々のビーズは免疫複合体の有無に関わらず、それぞれ個別に収容されます。
(A) 捕捉され酵素標識されたタンパク質分子と結合したビーズがアレイに充填されます。
(B) ビーズは重力によってアレイ表面に沈降し、その一部はマイクロウェルに落ち込み、残りは表面に留まります。
(C) シーリングオイルをチャネルに導入し、水性媒体と余分なビーズを排除してウェルに密封します。
(D) 密封されたウェルをイメージングします。捕捉・酵素標識されたタンパク質分子と結合したビーズを含んだウェルでは、蛍光シグナルが発生します。


実験の流れ


1. サンプル調製
サンプルの調製/分注、試薬の調製を行います。
2. サンプル測定
Simoa® HD-X Analyzer を使用してサンプルの測定を行います。
本サービスは、キャリブレーター、コントロール(ある場合)、ご提供頂いたサンプルで解析を実施いたします。
(検量線は、N=3 で測定を実施、サンプルは N=2 または 3 での測定を推奨しています。)

3. データ解析
専用ソフトウェアにより、検量線を用いて実測値を求めます。
4. 解析結果のご報告
データ解析結果を、CD-ROM に収めてご報告します。納期は、試薬キット及びサンプル到着後、15~20営業日程度です。
試薬キット納期(通常 3 ~4 週間程度)、解析サンプル数などにより、標準納期よりも長くお時間を頂戴する場合があります。詳しくは、当社営業担当者までお問合せください。


サンプル調製方法


サンプル サンプル調整方法
血清 室温で 2 時間凝固させ、2,000xg で 20 分間遠心後、分注してすぐに -20℃ 以下に保存。溶血していないものをご用意ください。
血漿 採血後 30 分以内に EDTA で処理した血液を 2,000xg で 20 分間遠心後、分注してすぐに -20℃ 以下に保存。
その他サンプル 遠心により固形物を除去し、分注してすぐに -20℃ 以下に保存。

◆サンプルに関する注意事項

必要なサンプル量は、キットおよびサンプル種によって異なります。詳細は、下記ラインナップ内の該当箇所、メーカー提供のキットのマニュアルをご確認ください。
測定サンプルの希釈は、キット付属のプロトコルに基づいて実施します。ご指定の希釈倍率がある場合、またはプロトコルに指定されていないサンプル種の場合は、QCシート(Excel)に希釈倍率をご記入ください。
受入れサンプルは、BSL2(バイオセーフティレベル 2)以下のものに限らせて頂きます。感染性が著しく高いサンプル(HIV、HCV、HBV ウイルス等に感染していることが確認されている患者由来の検体など)は、お受けできません。
ご提供頂くサンプル及び本作業から生じる知的財産権・工業所有権・安全性・インフォームドコンセント等の問題については、弊社では一切の責を負いかねます。
実験後のサンプルにつきましては、基本的には、弊社側にて破棄させて頂きますのでご了承ください。ご返却をご希望の場合、必ずご依頼時にお申込みください(有償)。残余サンプルがない場合、ご希望に沿えないこともございますので、予めご了承ください。

◆サンプル発送について
サンプルの発送は、必ず、「サンプル送付方法およびご注意点(PDF)」をご参照の上、その内容に従って行ってください。
サンプルの入ったチューブ(-20℃ で凍結した状態)に油性マジックでサンプル名を明記し、ビニールバッグなどに入れ、ドライアイスとともに梱包してください。
QCシート(Excel)をご記入後、サンプルに同封して頂き、ご指定の代理店経由、あるいは直送にて元払いでご発送ください。着払いの場合は受入れできませんので、予めご了承ください。
ご発送時は、冷凍宅配便をご指定ください。輸送時のトラブルに関しては、弊社ではその責任を負いかねます。
弊社営業日・営業時間は、土日祝祭日や年末年始などを除く、平日9時から17時までとなっております。サンプルの弊社到着日にご注意ください。また、休日をはさまない様に発送してください。
本確認事項を満たさない事項で、別途費用が発生した場合、お客様に費用のご負担をお願いすることがあります。

◆送付先
〒459-8011 名古屋市緑区定納山1丁目1409番地
フィルジェン株式会社 受託解析部 宛
Phone 052-624-4388 Fax 052-624-4389
<発送時に同封頂くもの> 解析用サンプル、QCシート、免責事項同意書、ドライアイス

◆その他の注意事項

キャンセルされる場合、キット代等、それまでの工程に応じた料金を請求いたします。
納品データのバックアップは、必ずお客様にてお取りください。弊社でのデータ保管期間は、発送日から 90 日間です。弊社での保管期間を経過したデータは破棄されます。


ラインナップ


シングルプレックス
使用キット サンプルタイプ *1 Dynamic Range *2
(pg/mL)
必要量 *3 Cat.#
ALZPath p-tau 217 Advantage PLUS E 0-30 63 μL F-104570
BD-Tau Advantage PLUS C 0-15,000 55 μL F-104797
E, S 0-600 55 μL
GFAP Advantage PLUS C 0-320,000 55 μL F-104691
E 0-3,200 55 μL
IFNa Multi Subtype Advantage PLUS E, S 0-24 80 μL F-103836
IL-1β Advantage PLUS E, S 0-48 55 μL F-105212
IL-5 Advantage PLUS E, S 0-60 55 μL F-105187
IL-6 Advantage PLUS E, S 0-160 55 μL F-105236
IL-10 Advantage PLUS E, S 0-300 55 μL F-105259
IL-12p70 Advantage PLUS E, S 0-60 55 μL F-105569
IL-17A Advantage PLUS E, S 0-24 80 μL F-104428
IL-22 Advantage PLUS E, S 0-200 55 μL F-105605
NF-Light Advantage PLUS C 0-45,000 55 μL F-104364
E, S 0-1,800 55 μL
PSD95 Advantage PLUS C, E, S 0-4,800 55 μL F-104904
p-Tau 181 Advantage PLUS C 0-5,000 55 μL F-104618
E, S 0-2,000 55 μL F-104588
p-Tau 217 Advantage PLUS E, S 0-20 116 μL F-104588
p-Tau 231 Advantage PLUS C 0-1,200 55 μL F-104512
E 0-600 55 μL
sTREM2 Advantage PLUS C, E 0-16,000 55 μL F-104542

マルチプレックス
使用キット サンプルタイプ *1 Dynamic Range *2
(pg/mL)
必要量 *3 Cat.#
Cytokine 4-Plex A (C4PA) Advantage PLUS E, S IL-1β: 0-48
IL-6: 0-160
IL-10: 0-300
TNFα: 0-400
55 μL F-104979
Cytokine 4-Plex B (C4PB) Advantage PLUS E, S IL-17A: 0-48
IL-4: 0-40
IL-13: 0-60
IL-5: 0-60
55 μL F-104997
Cytokine 4-Plex C (C4PC) Advantage PLUS E, S IL-2: 0-80
IL-6: 0-160
IFNγ: 0-160
IL-8: 0-320
55 μL F-105066
Neurology 2-Plex A (N2PA) Advantage PLUS C Abeta1-40: 0-18,000
Abeta1-42: 0-8,000
55 μL F-104712
E, S Abeta1-40: 0-180
Abeta1-42: 0-80
55 μL
Neurology 2-Plex B (N2PB) Advantage PLUS C GFAP: 0-320,000
NF-Light: 0-180,000
55 μL F-104670
E, S GFAP: 0-3,200
NF-Light: 0-1,800
55 μL
Neurology 4-Plex E (N4PE) Advantage PLUS C Abeta1-40: 0-18,000
Abeta1-42: 0-8,000
GFAP: 0-320,000
NF-Light: 0-180,000
55 μL F-104465
E Abeta1-40: 0-180
Abeta1-42: 0-80
GFAP: 0-3.200
NF-Light: 0-1,800
55 μL
Neurology 4-Plex D (N4PD) Advantage PLUS C BD-Tau: 0-15,000
GFAP: 0-80,000
NF-Light: 0-45,000
UCH-L1: 0-400,000
55 μL F-104822
E, S BD-Tau: 0-600
GFAP: 0-3,200
NF-Light: 0-1,800
UCH-L1: 0-16,000
55 μL
*1: キットの説明書に記載されているダイナミックレンジを参照しています。実際の LOD は検量線によって異なり、LOD 未満の数値は算出されません。
*2: C=脳脊髄液(CSF)、E=血漿(EDTA Plasma)、S=血清(Serum)
*3: 必要サンプル量は、シングル測定、装置内希釈を想定した最低液量です。固形物除去を行うため、∔20μL 程度をご準備ください。N 数分(繰り返し実験数分)を乗じてご準備ください。サンプル量が足りない場合は、適宜希釈して使用します。ご準備頂ける液量に制限がある場合は事前にご相談ください。
解析サンプルとして測定可能な反応数は 66 反応です。1 キット(96反応)のうち、30 反応を検量線およびコントコールに使用します。上記キット以外のラインアップについては、お問合せください。


本ウェブページは、製造元である Quanterix 社のウェブサイト情報およびその他資料を利用して作成されています。本ウェブページに掲載されている内容は、予告なく変更されることがあります。
【お問合せ】
受託解析部
Phone 052-624-4388

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