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・MultiPlex Suspension Array
+ 概要・実験の流れ
- サンプル必要量と調整方法
+ BIO-RAD製キット
+ ThermoFisher Scientific (invitrogen)製キット
+ Merck(Millipore)製キット
+ Thermo Fisher Scientific (affymetrix)製キット
+ R&D Systems製キット
+ QCシート
  
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マルチプレックス サスペンションアレイ(Bio-Plex, Luminex) 受託解析サービス
概要・実験の流れ/サンプル必要量と調整方法 / QCシート
BIO-RAD製キット / Thermo Fisher Scientific(invitrogen)製キット / Merck(Millipore)製キット / Thermo Fisher Scientific(affymetrix)製キット / R&D Systems製キット
1種類のサンプルで、最大100種類の異なった生体成分を分析するために開発された、フレキシブルで使いやすい、マルチプレックス分析システム「Bio-PlexTMサスペンションアレイシステム(Bio-PlexTM 200)」と、
Bio-PlexTM Assay Kits(BIO-RAD製)
Luminex® Multiplex Assays(Thermo Fisher Scientific/invitrogen製)
MILLIPLEXTM MAP Multiplex Kit(Merck/Millipore製)
ProcartaPlexTM Multiplex Panel(Thermo Fisher Scientific/affymetrix製)
Luminex Assay/Luminex High Performance Assay(R&D Systems)など
を用いた受託解析サービスです。
マルチプレックスで、サイトカインなどの発現定量解析を行うサービスです。少量サンプル、多数検体の場合に、最適でお得なサービスです。サンプルをお預かりし、解析データをCDに収録してお届けします。
本サービスは、医薬品GLP準拠体制を導入運用して、試験を実施しています。


サンプル必要量と調整方法

サンプル種 サンプルの必要量と調整方法
Bio-Plexサイトカインアッセイ
(BIO-RAD)
Bio-Plexリン酸化アッセイ
(BIO-RAD)
Luminex® Multiplex Assays
(Thermo Fisher Scientific
/invitrogen)
Milliplex MAP Kit
(Merck/Millipore)
ProcartaPlex Multiplex Panel
(Thermo Fisher Scientific
/affymetrix)
Luminex Assay
(R&D Systems®)
細胞培養上清 50uL以上/Well - 50uL以上/Well 25uL以上/Well 50uL以上/Well 25uL以上/Well
細胞培養液を回収後、遠心により固形物を除去し、分注してすぐに-20℃以下に冷凍保存。
使用したメディウム「8mL以上/プレート」をご準備頂き、サンプルと同時にお送り下さい。
血清 12.5uL以上/well - 50uL以上/Well 25uL以上/Well 25uL以上/Well 25uL以上/Well
血清分離用チューブで回収するか、血液を30分おいて凝固させ、1000×gで15分遠心後、分注してすぐに-20℃以下に保存。
溶血していないものをご用意ください。
血漿 12.5uL以上/well - 50uL以上/Well 25uL以上/Well 25uL以上/Well 25uL以上/Well
・EDTA
・クエン酸Na
・EDTA
・ヘパリン
・クエン酸Na
・EDTA
・クエン酸Na
・EDTA
・クエン酸Na
・ヘパリン
採血後30分以内にEDTA、ヘパリン、クエン酸Naで処理した血液を1000×gで15分遠心後、分注してすぐに-20℃に保存。

【Bio-Plexサイトカインアッセイ、Milliplex Kit(Merck Millipore)、及び、ProcartaPlex Multiplex Panel(Affymetrix®)を使用する場合】
・ヘパリンで処理したものはお受けできません。
組織・細胞
抽出タンパク質
- ・Cell Signaling(磁気ビーズ)
Cell Lysate

50uL以上/Well
・ポリビーズ
Cell Lysate
25uL以上/Well
50uL以上/Well 25uL以上/Well
(*1)
- -
*1 Milliplex Kitは、組織・細胞ライセートに対応しているキットと、対応していないキットがあります。
  各キットのページでご確認ください。

組織・細胞抽出タンパク質を-20℃以下に保存。
使用した抽出試薬を100uL程度、サンプルと同時にお送りください。

【Bio-Plex
TMリン酸化アッセイ(BIO-RAD)を使用する場合】
Bio-PlexTMCell Lysisキット(BIO-RAD Cat.#171-304011)を使用して、細胞からタンパク質を抽出して下さい。
また、キットの希釈Bufferも一緒にご送付願います。
DCプロテインアッセイキットⅡ(BIO-RAD Cat.#5000112JA)を使用してタンパク質の量を測定してください。

【Luminex® Multiplex Assays(ThermoFisher Scientific)を使用する場合】
Tissue Extraction ReagentⅠ(ThermoFisher Scientific, Cat.#FNN0071)を使用して、組織からタンパク質を抽出してください。
Cell Extraction Buffer(ThermoFisher Scientific, Cat.#FNN0011)を使用して、細胞からタンパク質を抽出してください。
体液 - - - - 25uL/well
必要サンプル量は、キットによって、多少異なることがありますので、詳細はメーカー提供のキットのマニュアルをご確認ください。
キットのマニュアルは、弊社の各メーカー毎のページから、ダウンロードして頂くこともできます。
上記の必要サンプル量に、ピペットロス分を見込んだ量(1割り増し程度)をご準備ください。

≫サンプルご準備に関する注意事項
サンプル量が足りない場合は、正確な解析が行えません。
上記の量は、「N=1」の際のサンプル量となります。「N=2」の場合は2倍量、「N=3」の場合は3倍量のサンプルが必要になります。
キットプロトコールに基づいて、測定サンプルを希釈します。プロトコールに指定されていない場合は、原液測定となります。なお、希釈倍率をご指定の場合は、QCシートにご記入ください。
ご送付頂くサンプルは、できるだけ新鮮なものをご用意下さい。サンプルは、採取後、すぐに凍結してください。
凍結・融解を繰り返したサンプルは避けてください。
血清は、できるだけ溶血していないものをご用意ください。
血漿は、各キットによって、対応している抗凝固剤が異なりますので、ご注意ください。
組織・細胞抽出液の場合は、使用した抽出試薬を100uL程度、サンプルと同時にお送りください。
細胞培養上清の場合は、使用したメディウム「8mL以上/プレート」をご準備頂き、サンプルと同時にお送り下さい。
お預かりできるサンプルは、BSL2(バイオセーフティレベル2)までのものに限らせていただきます。感染性が著しく高いサンプル(HIV, HCV, HBVウイルスに感染していることが確認されている患者由来の検体など)は、お受けできませんので、ご了承ください。
ご提供頂くサンプルおよび本作業から生じる知的財産権・工業所有権・安全性・インフォームドコンセント等の問題について、弊社では一切の責を負いかねます。

≫梱包と発送に関する注意事項
サンプルの発送は、必ず、「サンプル送付方法およびご注意点(PDF)」をご参照の上、その内容に従って行ってください。
サンプルの入ったチューブ(-20℃で凍結した状態)に油性マジックでサンプル名を明記し、ビニールパックなどに入れ、ドライアイスとともに梱包してください。
QCシートをご記入後、サンプルに同封頂き、ご指定の代理店経由、あるいは直送にて、ご発送ください。
ご発送時は、冷凍宅急便をご指定ください。輸送時のトラブルに関しては、弊社ではその責任を負いかねます。
弊社営業日は、土日祝日や年末年始などを除く、平日9時から17時までとなっておりますので、サンプルの弊社到着日にご注意ください。

≫送付先
〒459-8011 名古屋市緑区定納山1丁目1409番地
フィルジェン株式会社 受託解析部 宛
Tel 052-624-4388 Fax 052-624-4389


本ページは、BIO-RAD社及び、Thermo Fisher Scientific社、Merck社のHomepageの一部を引用させて頂いております。
お問い合わせ 受託解析部: biosupport@filgen.jp P.052-624-4388 https://filgen.jp/
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