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クローニング&発現キット/スタンダードクローニングキット


クローニング&発現キット

本製品は、NZYEasy酵素ミックスを介した単一の反応で、pUCベクターにクローニングされたPCR生成フラグメントまたは合成遺伝子を直線化pHTPベクターに方向性クローニングするためのキットです。高いクローニング効率を有し、DNAリガーゼやインサートの制限消化、リン酸化、平滑末端ポリッシングなどが不要です。



◆特長

・リガーゼ非依存性クローニング
・PCRフラグメントの追加処理不要(制限消化、リン酸化、平滑末端ポリッシングなど)
・高いクローニング効率
・方向性クローニング
・複数のインサートを1つのベクターに同時にクローニング可能
・クローニングまたは細菌タンパク質発現のどちらにも使用可能
・様々な融合タグを含む発現ベクターが付属

◆キットについて

【キット内容物】
NZYEasy 酵素ミックス NZYEasy 酵素ミックスは、ライゲーションに依存しないクローニング用の独自の配合をされています。遺伝子に組み込まれたベクター相補配列を認識し、この部位に一本鎖オーバーハングを生成します。この様に生成されたインサートは、pHTPベクターに簡単にクローン化でき、必要な一本鎖相補末端を持つ直線状の形で提供されます。
pHTPベクター pHTPクローニングおよび発現ベクターは、直線化された、すぐに使用できる形で提供されます。キットにより含まれるベクターが異なります。
ポジティブコントロール
インサート
クローニング・形質転換反応の効率、および組換えタンパク質発現レベルの評価用のポジティブコントロールです。クローニングに必要な配列が隣接する500bpのPCR産物で構成されています。

【キットに含まれていないが必要な試薬(別売)】

・NZYProof(品番:MB146)またはSupreme NZYProofDNAポリメラーゼ(品番:MB283)
 ※同メーカーの非校正DNAポリメラーゼ(品番:MB001またはMB079)もご使用いただけます。
 また、プラスミドのDNAテンプレートを不活性化するには、DpnI (品番:MB078)の使用を推奨しています。
・LBブロス(品番:MB028)またはLB寒天培地(品番:MB118)、NZY自動誘導LB培地(粉末)(品番:MB179)
・アンピシリン(品番:MB021)またはカナマイシン(品番:MB020)
・NZY5αコンピテントセル(品番:MB004)またはBL21(DE3)コンピテントセル(品番:MB006)

◆価格と製品ラインナップ

キットによって付属するベクター(発現タンパク質の融合タグ)が異なります。ご自分の実験に最適なキットをご選択ください。

NZYEasy クローニングエクスプレッションシステム ユーザーガイド
pHTP ベクターを使用したマルチフラグメントクローニングのマニュアル

品名 税別価格/品番 データシート ベクター
¥49,000
(8反応分)
¥72,000
(96反応分)
【高コピー数クローニングベクター。青/白スクリーニング可能(IPTGおよびX-GALを追加する場合)】
NZYEasy Cloning Kit
MB28101 MB28103 pHTP0
【大腸菌での高レベルのタンパク質発現用の標準ベクター】
NZYEasy Cloning & Expression Kit I
MB28201 MB28203 pHTP1
【Leader Less DsbCにより、ジスルフィド結合の細胞質異性化を促進】
NZYEasy Cloning & Expression Kit II
MB31901 MB31903 pHTP2
【不活性DsbCにより、ジスルフィド結合の異性化なしに細胞質の可溶化を促進】
NZYEasy Cloning & Expression Kit III
MB32001 MB32003 pHTP3
【DsbCによりジスルフィド結合のペリプラズム異性化を促進】
NZYEasy Cloning & Expression Kit IV
MB32101 MB32103 pHTP4
【DsbAによりジスルフィド結合のペリプラズム形成を促進】
NZYEasy Cloning & Expression Kit VII
MB32201 MB32203 pHTP7
【Trxによりタンパク質の溶解性を促進】
NZYEasy Cloning & Expression Kit VIII
MB32301 MB32303 pHTP8
【GFPによりタンパク質の局在をモニタリング可能】
NZYEasy Cloning & Expression Kit IX
MB32401 MB32403 pHTP9
【NusAによりタンパク質の溶解性を促進】
NZYEasy Cloning & Expression Kit X
MB32501 MB32503 pHTP10
【GSTによりタンパク質の溶解性を高めながら、タグ付きタンパク質のグルタチオンベースのアフィニティーが精製可能】
NZYEasy Cloning & Expression Kit XI
MB32601 MB32603 pHTP11
【GB1によりタンパク質の溶解性を促進】
NZYEasy Cloning & Expression Kit XIII
MB32701 MB32703 pHTP13
【KSIによりタンパク質の溶解性を促進】
NZYEasy Cloning & Expression Kit XIV
MB32801 MB32803 pHTP14
【CpAによりタンパク質の溶解性を促進】
NZYEasy Cloning & Expression Kit XVI
MB32901 MB32903 pHTP16
【CpBによりタンパク質の溶解性を促進】
NZYEasy Cloning & Expression Kit XVII
MB33001 MB33003 pHTP17


スタンダードクローニングキット

◆NZY-blunt PCR Cloning Kit
校正DNAポリメラーゼを使用したPCR増幅から生じる平滑末端を持つPCR産物を直接クローニングするためのキットです。

≫高効率クローニング(90%以上の陽性クローン)
≫時間のかかる制限消化が不要
≫青/白スクリーニング

◆NZY-A PCR Cloning Kit
非校正DNAポリメラーゼを使用した増幅の結果として生じる3’-AオーバーハングのあるPCR産物を直接クローニングするためのキットです。AオーバーハングPCR産物のクローニングやAテーリング処理後のクローン平滑末端PCR産物のクローニングにお使いいただけます。より高速なクローニングの場合は、高速バージョンの NZY-A Speed PCR Cloning Kit をご選択ください。

≫簡単なTAクローニング手順
≫高効率クローニング(90%以上の陽性クローン)
≫時間のかかる制限消化が不要
≫青/白スクリーニング

品名 容量 税別価格 品番 データ
シート
ベクター
(ベクター
マップ)
【校正酵素によって増幅された平滑末端PCR産物のクローニングに】
NZY-blunt PCR Cloning Kit
24ライゲーション
+コンピテントセル
¥71,000 MB12101 pNZY28
24ライゲーション ¥62,000 MB12102
【非校正ポリメラーゼを使用して増幅されたDNAフラグメントのクローニングに】
NZY-A PCR Cloning Kit
24ライゲーション
+コンピテントセル
¥70,000 MB05301
24ライゲーション ¥60,000 MB05302
【NZY-A PCR Cloning Kit の高速バージョン】
NZY-A Speedy PCR Cloning Kit
24ライゲーション
+コンピテントセル
¥73,000 MB13701
24ライゲーション ¥66,000 MB13702

お問い合わせ 試薬部: biosupport@filgen.jp P.052-624-4388 https://filgen.jp/
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