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ArrayStar社 遺伝子発現制御機構解析
non-coding RNA マイクロアレイ受託解析サービス
LncRNA Arrays / small RNA Array / SE-LncRNA Array / LncPathTM Pathway LncRNA Arrays / CircRNA Array / T-UCR Array / piRNA Array / DoG RNA Array / GlycoRNA Array(GlycoRNA 研究) / 受託解析サービスの流れ

Arraystar社の各種アレイを用いた受託解析サービスをご提供いたします。ベストセラーである LncRNA マイクロアレイをはじめ、CircRNA マイクロアレイ、T-UCR マイクロアレイ、piRNA マイクロアレイ、DoG RNA マイクロアレイ、GlycoRNA マイクロアレイの受託サービスを提供しています。


 GlycoRNA Array 受託解析サービス


本サービスでは、glycoRNA の生化学的捕捉方法とマイクロアレイによる RNA 検出を組み合わせて、glycoRNA 発現を定量およびプロファイリングします。これら 2 つの高度な技術の統合することで両者の長所を活かし、高い特異性、感度、精度を実現します。 GlycoRNA アレイは、Y-RNA/Y-RNA フラグメント、 tRNA、tsRNA(tiRNA および tRF)、pre-miRNA、miRNA、 snRNA/snRNA フラグメント、snoRNA/snoRNA フラグメント、 rRNA/rRNA フラグメント、scRNA など、幅広いグリコシル化 RNA クラスをカバーしています。

この最先端のアプローチにより、研究者は包括的な glycoRNA 発現の詳細を取得し、遺伝子制御、細胞機能、およびヒト疾患における新しいクラスの RNA 分子を発見し、理解することができます。


【GlycoRNA 研究】
GlycoRNA とは?
 GlycoRNAは、Y-RNA、tRNA、miRNA、核内低分子 RNA(snRNA)、核小体低分子 RNA(snoRNA)、
 リボソームRNA(rRNA)などの糖鎖修飾低分子ノンコーディング RNA です。
なぜ GlycoRNA を研究するのか?
 glycoRNA は、がん、心血管疾患、神経疾患、免疫疾患、呼吸器疾患における新たな研究分野として
 登場し、新たなバイオマーカーおよび治療応用への新たな道を切り開いています。
GlycoRNA の研究方法

関連文献


【特長】
glycoRNA は、レクチン結合、代謝標識/クリックケミストリー、過ヨウ素酸酸化およびアルデヒド標識(pAL)などの生化学的方法によって捕捉することができます。GlycoRNA アレイでは捕捉された glycoRNA を検出および定量することが可能です。本サービスは glycoRNA 捕捉技術と GlycoRNA マイクロアレイを組み合わせ、特異的な glycoRNA 捕捉とマイクロアレイによる高感度/特異性/精度のRNA検出という両技術の強みを活かした glycoRNA 生物学の分野における最先端のアプローチです 。研究者は、glycoRNA の分子/細胞機能および生物学/疾患という新しい科学領域において、詳細かつ包括的な glycoRNA プロファイリング情報を得ることができるようになりました。以下は、GlycoRNA Array アプローチの主な利点です。

◆包括的なグルコシル化 RNA プロファイリング
GlycoRNA アレイは、Y-RNA/Y-RNA フラグメント、tRNA、tsRNA(tiRNA および tRF)、pre-miRNA、miRNA、snRNA/snRNA フラグメント、snoRNA/snoRNA フラグメント、rRNA/rRNA フラグメント、scRNA など、幅広い small RNA クラスを同時にカバーします。シーケンシングによる glycoRNA の検出には、そのユニークな生化学的特性のため、これらの small RNA の異なるクラス毎に個別の特殊なシーケンシングケミストリーとシーケンシングの実行が必要になります。

◆感度と信頼性の向上
glycoRNA 捕捉ステップにより、glycoRNA の検出シグナルが実際にグリコシル化 RNA に由来するものであることが保証されるため、偽陽性を低減し、結果の信頼性を高めることができます。glycoRNA の捕捉とマイクロアレイシグナルの非常に高い感度を組み合わせることで、S/N 比が向上し、低存在量でも glycoRNA をより適切に検出することができます。
        
◆新規 GlycoRNA の発見
GlycoRNA アレイには、グリコシル化の既知または未知に関わらず、ゲノム内のすべての small RNA が含まれています。マイクロアレイ上で検出された糖鎖捕捉 RNA は、過去に報告されていなければ、新規の glycoRNA として同定されます。したがって、あらかじめ印刷されたマイクロアレイに、シークエンシングのような新規 glycoRNA を発見する能力を持っているかどうかを心配する必要はありません。

◆前例のない科学的および医学的な可能性
すぐに利用できる GlycoRNA アレイのプロファイリングデータに簡単にアクセスできるようになったことで、研究者はこの新しいクラスの glycoRNA 分子によって切り開かれる多くの前例のない科学分野を探求できるようになりました: 遺伝子、細胞、分子制御における RNA グリコシル化とグリコシル化 RNA、glycoRNA に基づく/配列特異的な細胞表面および細胞外相互作用と伝達、受容体に対する新しいクラスのリガンド、新規の生物学的および疾患機能、 新しい医薬品ターゲット、および免疫学的および配列学的二重検出が可能な新しい細胞外バイオマーカーなど。

【仕様】

表1.ヒト GlycoRNA アレイの仕様
Arraystar Human GlycoRNA Array v1.0
個別プローブ総数 7,646
プローブ設計 5'-ヘアピンキャップと 3'-スペーサーを備えた small RNA 特異的配列
プローブ部位 miRNA/5'tsRNA: 3'-配列
3'tsRNA/Y-RNA/snRNA/snoRNA/rRNA 由来の断片: 完全長配列内の任意セグメント
pre-miRNA: pre-miRNA のループ領域
tRNA: 成熟 tRNA のアンチコドンループ配列
Y-RNA/snoRNA/snRNA/rRNA: RNA 全長における特異的配列
プローブ特異性 small RNA 特異的
アレイフォーマット 8x15K
Small RNA のカバレッジ ソース
YsRNA(Y-RNA 由来 small RNA) 10 文献[41-44]
snsRNA(snRNA 由来 small RNA) 4 文献[48]
sdRNA(snoRNA 由来 small RNA) 289 文献[46-49]
rRF(rRNA 由来 small RNA) 210 MINTbase (V1);文献[45]
miRNA 2,627 miRBase (v22)
tsRNA(tRNA 由来 small RNA) 1,432 tRFdb, MINTbase, GtRNADb (v18.1, 2019.08);2019年までの文献[1-40]
pre-miRNA 1,745 miRBase (v22)
成熟 tRNA 338 GtRNADb (v18.1, 2019.08);ENSEMBL (v99)
snoRNA 955 ENSEMBL (v99)
Y-RNA 4 RNAcentral (V24);RefSeq (2024.08)
snRNA 27
rRNA 5

【Reference】

tRF-5[1-7];tRF-3[8-18];i-tRF[19-21];tRF-1[8, 21-28];5-Leader[29];5'-tiRNA[30-39];3'-tiRNA[33, 40]
1. Guzzi N et al: Pseudouridylation of tRNA-Derived Fragments Steers Translational Control in Stem Cells. Cell 2018, 173(5):1204-1216 e1226.[PMID: 29628141]
2. Keam SP et al: The human Piwi protein Hiwi2 associates with tRNA-derived piRNAs in somatic cells. Nucleic Acids Res 2014, 42(14):8984-8995.[PMID: 25038252]
3. Keam SP, Sobala A, Ten Have S, Hutvagner G: tRNA-Derived RNA Fragments Associate with Human Multisynthetase Complex (MSC) and Modulate Ribosomal Protein Translation. J Proteome Res 2017, 16(2):413-420.[PMID: 27936807]
4. Zhang X et al: IL-4 Inhibits the Biogenesis of an Epigenetically Suppressive PIWI-Interacting RNA To Upregulate CD1a Molecules on Monocytes/Dendritic Cells. J Immunol 2016, 196(4):1591-1603.[PMID: 26755820]
5. Honda S et al: The biogenesis pathway of tRNA-derived piRNAs in Bombyx germ cells. Nucleic Acids Res 2017, 45(15):9108-9120.[PMID: 28645172]
6. Cole C et al: Filtering of deep sequencing data reveals the existence of abundant Dicer-dependent small RNAs derived from tRNAs. RNA 2009, 15(12):2147-2160.[PMID: 19850906]
7. Sobala A, Hutvagner G: Small RNAs derived from the 5' end of tRNA can inhibit protein translation in human cells. RNA Biol 2013, 10(4):553-563.[PMID: 23563448]
8. Lee YS, Shibata Y, Malhotra A, Dutta A: A novel class of small RNAs: tRNA-derived RNA fragments (tRFs). Genes Dev 2009, 23(22):2639-2649.[PMID: 19933153]
9. Huang B et al: tRF/miR-1280 Suppresses Stem Cell-like Cells and Metastasis in Colorectal Cancer. Cancer Res 2017, 77(12):3194-3206.[PMID: 28446464]
10. Kuscu C et al: tRNA fragments (tRFs) guide Ago to regulate gene expression post-transcriptionally in a Dicer-independent manner. RNA 2018, 24(8):1093-1105.[PMID: 29844106]
11. Kim HK et al: A transfer-RNA-derived small RNA regulates ribosome biogenesis. Nature 2017, 552(7683):57-62.[PMID: 29186115]
12. Kim HK et al: A tRNA-Derived Small RNA Regulates Ribosomal Protein S28 Protein Levels after Translation Initiation in Humans and Mice. Cell Rep 2019, 29(12):3816-3824 e3814.[PMID: 31851915]
13. Yeung ML et al: Pyrosequencing of small non-coding RNAs in HIV-1 infected cells: evidence for the processing of a viral-cellular double-stranded RNA hybrid. Nucleic Acids Res 2009, 37(19):6575-6586.[PMID: 19729508]
14. Schorn AJ, Gutbrod MJ, LeBlanc C, Martienssen R: LTR-Retrotransposon Control by tRNA-Derived Small RNAs. Cell 2017, 170(1):61-71 e11.[PMID: 28666125]
15. Maute RL et al: tRNA-derived microRNA modulates proliferation and the DNA damage response and is down-regulated in B cell lymphoma. Proc Natl Acad Sci U S A 2013, 110(4):1404-1409.[PMID: 23297232]
16. Ruggero K et al: Small noncoding RNAs in cells transformed by human T-cell leukemia virus type 1: a role for a tRNA fragment as a primer for reverse transcriptase. J Virol 2014, 88(7):3612-3622.[PMID: 24403582]
17. Falconi M et al: A novel 3'-tRNA(Glu)-derived fragment acts as a tumor-suppressor in breast cancer by targeting nucleolin. FASEB J 2019:fj201900382RR.[PMID: 31560576]
18. Zhou K et al: A tRNA fragment, tRF5-Glu, regulates BCAR3 expression and proliferation in ovarian cancer cells. Oncotarget 2017, 8(56):95377-95391.[PMID: 29221134]
19. Goodarzi H et al: Endogenous tRNA-Derived Fragments Suppress Breast Cancer Progression via YBX1 Displacement. Cell 2015, 161(4):790-802.[PMID: 25957686]
20. Natt D et al: Human sperm displays rapid responses to diet. PLoS Biol 2019, 17(12):e3000559.[PMID: 31877125]
21. Veneziano D et al: Dysregulation of different classes of tRNA fragments in chronic lymphocytic leukemia. Proc Natl Acad Sci U S A 2019, 116(48):24252-24258.[PMID: 31723042]
22. Haussecker D et al: Human tRNA-derived small RNAs in the global regulation of RNA silencing. RNA 2010, 16(4):673-695.[PMID: 20181738]
23. Balatti V et al: tsRNA signatures in cancer. Proc Natl Acad Sci U S A 2017, 114(30):8071-8076.[PMID: 28696308]
24. Cho H et al: Regulation of La/SSB-dependent viral gene expression by pre-tRNA 3' trailer-derived tRNA fragments. Nucleic Acids Res 2019, 47(18):9888-9901.[PMID: 31504775]
25. Babiarz JE et al: Mouse ES cells express endogenous shRNAs, siRNAs, and other Microprocessor-independent, Dicer-dependent small RNAs. Genes Dev 2008, 22(20):2773-2785.[PMID: 18923076]
26. Hasler D et al: The Lupus Autoantigen La Prevents Mis-channeling of tRNA Fragments into the Human MicroRNA Pathway. Mol Cell 2016, 63(1):110-124.[PMID: 27345152]
27. Pekarsky Y et al: Dysregulation of a family of short noncoding RNAs, tsRNAs, in human cancer. Proc Natl Acad Sci U S A 2016, 113(18):5071-5076.[PMID: 27071132]
28. Liao JY et al: Deep sequencing of human nuclear and cytoplasmic small RNAs reveals an unexpectedly complex subcellular distribution of miRNAs and tRNA 3' trailers. PLoS One 2010, 5(5):e10563.[PMID: 20498841]
29. La Ferlita A et al: Identification of tRNA-derived ncRNAs in TCGA and NCI-60 panel cell lines and development of the public database tRFexplorer. Database (Oxford) 2019, 2019.[PMID: 31735953]
30. Honda S et al: Sex hormone-dependent tRNA halves enhance cell proliferation in breast and prostate cancers. Proc Natl Acad Sci U S A 2015, 112(29):E3816-3825.[PMID: 26124144]
31. Donovan J, Rath S, Kolet-Mandrikov D, Korennykh A: Rapid RNase L-driven arrest of protein synthesis in the dsRNA response without degradation of translation machinery. RNA 2017, 23(11):1660-1671.[PMID: 28808124]
32. Hanada T et al: CLP1 links tRNA metabolism to progressive motor-neuron loss. Nature 2013, 495(7442):474-480.[PMID: 23474986]
33. Saikia M et al: Angiogenin-cleaved tRNA halves interact with cytochrome c, protecting cells from apoptosis during osmotic stress. Mol Cell Biol 2014, 34(13):2450-2463.[PMID: 24752898]
34. Wang Q et al: Identification and functional characterization of tRNA-derived RNA fragments (tRFs) in respiratory syncytial virus infection. Mol Ther 2013, 21(2):368-379.[PMID: 23183536]
35. Deng J et al: Respiratory Syncytial Virus Utilizes a tRNA Fragment to Suppress Antiviral Responses Through a Novel Targeting Mechanism. Mol Ther 2015, 23(10):1622-1629.[PMID: 26156244]
36. Zhou J et al: Identification of two novel functional tRNA-derived fragments induced in response to respiratory syncytial virus infection. J Gen Virol 2017, 98(7):1600-1610.[PMID: 28708049]
37. Yang X et al: 5-methylcytosine promotes mRNA export - NSUN2 as the methyltransferase and ALYREF as an m(5)C reader. Cell Res 2017, 27(5):606-625.[PMID: 28418038]
38. Ivanov P et al: Angiogenin-induced tRNA fragments inhibit translation initiation. Mol Cell 2011, 43(4):613-623.[PMID: 21855800]
39. Ivanov P et al: G-quadruplex structures contribute to the neuroprotective effects of angiogenin-induced tRNA fragments. Proc Natl Acad Sci U S A 2014, 111(51):18201-18206.[PMID: 25404306]
40. Schaffer AE et al: CLP1 founder mutation links tRNA splicing and maturation to cerebellar development and neurodegeneration. Cell 2014, 157(3):651-663.[PMID: 24766810]
41. Francisco et al: Biogenesis of Y RNA-derived small RNAs is independent of the microRNA pathway. FEBS Letters, Volume 586, Issue 8, 2012,Pages 1226-1230.
42. Billmeier et al: Mechanistic insights into non-coding Y RNA processing. RNA Biology,2022, 19(1), 468–480.
43. Gal Nechooshtan et al: Processing by RNase 1 forms tRNA halves and distinct Y RNA fragments in the extracellular environment. Nucleic Acids Research, 2020,Volume 48, Issue 14, Pages 8035–8049.
44. Darja Elzer et al: Human sperm heads harbor modified YsRNA as transgenerationally inherited non-coding RNAs. Frontiers in Genetics, 2023, Sec. RNA Volume 14.
45. Venetia Pliatsika et al: MINRbase: a comprehensive database of nuclear- and mitochondrial-ribosomal-RNA-derived fragments (rRFs), Nucleic Acids Research, 2024, Volume 52, Issue D1, Pages D229–D238.
46. Coley AB et al. Small Nucleolar Derived RNAs as Regulators of Human Cancer. Biomedicines. 2022; 10(8):1819.
47. Coley AB et al: MicroRNA-like snoRNA-Derived RNAs (sdRNAs) Promote Castration-Resistant Prostate Cancer. Cells. 2022; 11(8):1302.
48. Yang Shi et al: Dicer-independent snRNA/snoRNA-derived nuclear RNA 3 regulates tumor-associated macrophage function by epigenetically repressing inducible nitric oxide synthase transcription. Cancer Communications, February 2021,Volume41,Issue2,Pages 140-153.
49. Ken Nakatsu et al: sRNAfrag: a pipeline and suite of tools to analyze fragmentation in small RNA sequencing data. Briefings in Bioinformatics, January 2024, Volume 25, Issue 1, bbad515.

【バイオインフォマティクス解析の概要とその一例】

GlycoRNA マイクロアレイは、glycoRNA のプロファイリングと解析において、最も高感度で、効果的、かつ堅牢な方法です。プロファイリングデータには、glycoRNA の豊富なバイオインフォマティクス解析とアノテーションが含まれています。


表1.差次的に発現する glycoRNA

Symbol: glycoRNA シンボル
Trans type: 転写物のバイオタイプ
Precursor: small RNA 由来フラグメントのプリカーサーID/シンボル
Description: アノテーションの説明
Fold Change: 比較グループ間の Fold change
Regulation: Group1 と Group2 の比較によるアップレギュレーションまたはダウンレギュレーション
P-value: t 検定による p 値

【ワークフロー】

本サービスは、Total RNA~データ解析までのフルパッケージです。
1. RNA サンプルの受け取り
2. RNA の QC チェック:濃度、純度、完全性(分解度)
3. レクチン小麦胚芽凝集素(WGA: Wheat germ aggutinin)への親和性結合による glycoRNA の濃縮
4. 直接末端標識
5. アレイハイブリダイゼーション、洗浄、スキャンニング
6. データ抽出、解析、サマリーレポート作成


図1.レクチン小麦胚芽凝集素(WGA)磁気ビーズ補足を用いた Arraystar GlycoRNA マイクロアレイのフローチャート
glycoRNA を、レクチン小麦胚芽凝集素 (WGA) 磁気ビーズへのアフィニティー結合により、 Total RNA から捕捉する。
捕捉された glycoRNA を、標準的な TRIzol Reagent 抽出法により溶出する。
抽出した glycoRNA に T4 ポリヌクレオチドキナーゼを処理し、残存している 3'-モノリン酸 (P)基と環状リン酸 (cP)基を除去して 3'-OH 末端を調製する。
glycoRNA の 3'-OH 末端を、T4 RNA リガーゼにより Cy3C 蛍光色素で標識する。
Cy3 標識された glycoRNA を Arraystar GlycoRNA マイクロアレイにハイブリダイズし、アレイ上の低分子 glycoRNA のプロファイリングを行う。

【納品物】

解析終了後、弊社報告書の他、以下のデータを DVD 等の記録メディアに収録してご提供いたします。
1. 解析ソフトウェア上から精製された全てのマイクロアレイ生データファイル
2. Arraystar 社による実施プロジェクトの解析レポート(word 形式)
3. 以下に関する Excel 形式のデータテーブル
 ・生のシグナル強度および正規化シグナル強度
 ・fold-change および p-value のカットオフによる発現変動 small RNA (標準カットオフは|FC|≧2、P≦0.05)
 ・Y-RNA/Y-RNA フラグメント、tRNA、tsRNA(tiRNA および tRF)、pre-miRNA、miRNA、
  snRNA/snRNA フラグメント、snoRNA/snoRNA フラグメント、rRNA/rRNA フラグメント、scRNA の詳細なアノテーション
4. ボックスプロットおよびスキャッタープロット
5. 階層的クラスタリングヒートマップ
6. ボルケーノプロット(実験設定に該当しない場合は含まれません)
7. サンプル QC レポート

【サンプル条件】
品質条件 詳細
サンプルタイプ Total RNA(small RNA を含む, sizes<200nt)
必要量 推奨量:>20μg、最低量:>10μg
濃度(Nanodrop に基づく) >20ng/μL
純度(Nanodrop に基づく) O.D.260/280:2.0(許容範囲:1.7~2.0)
O.D.260/230:>1.8
RNA Integrity ゲル電気泳動:18S および 28S rRNA のバンドが確認でき、28S および 18S rRNA のバンド比が 2:1 程度であること。
BioAnalyzer:RIN>7.0

※血清、血漿、エクソソームおよび FFPE など、分解や断片化され品質低下がよく知られているサンプルに由来する RNA については、解析結果の品質が低い可能性があります。お客様の同意があれば、ご提出いただいたサンプルで解析を行うことが可能ですが、データ品質が悪い、あるいはデータが取得できない可能性もあり、データ取得の保証はできませんので、予めご注意ください。
DNase、RNase フリーの 1.5mL または 2mL マイクロチューブを使用してください(スクリューキャップ式を推奨)。
ヌクレアーゼフリーの分子生物学グレードの水に溶解し、-80℃で保存してください。
サンプルは、DNase 処理を行うことを推奨いたします。
UV スペクトルベースの濃度測定法では不正確になる場合がありますので、蛍光ベースでの測定を強く推奨します。
UV スペクトルベースで測定した場合、上記よりも多いサンプルをご準備ください。

【価格】

本サービスのご依頼方法につきましては、「受託解析サービスの流れ」をご確認ください。
サービス名 生物種 受注受付 税別価格
(1サンプル)
品番
GlycoRNA Array 受託解析サービス ヒト 1サンプルから
受注受付
¥246,000 F-AS-GRH-[サンプル数]
上記の他、サンプルの海外輸送費が別途発生いたします。

【納期】

約 2 ~ 2.5 か月
※サンプルQC合格の場合
                                        

*本サイトの情報は、Arraystar社のHomepageの情報を一部引用しております。

【お問合せ】
受託解析部
Phone 052-624-4388

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